Médecine interne ADN ribosomal de l’espèce Helicobacter récupéré du tissu hépatique de patients chinois atteints d’un carcinome hépatocellulaire primaire

ADN ribosomal de l’espèce Helicobacter récupéré du tissu hépatique de patients chinois atteints d’un carcinome hépatocellulaire primaire

Nous avons examiné l’ADN ribosomique S des espèces de Helicobacter dans des échantillons de tissus hépatiques prélevés chez des patients atteints de carcinome hépatocellulaire Soixante pour cent de ces échantillons étaient positifs pour les espèces Helicobacter Quatre fragments d’ADNr S provenant d’échantillons PCR positifs ont été directement séquencés Par comparaison de séquence, tous se sont révélés être% identiques à l’ARNr S de Helicobacter pylori

Helicobacter pylori a été largement reconnu comme pathogène dans l’étiologie de la gastrite antrale chronique et de l’ulcération peptique. H pylori est également lié au cancer et est considéré comme un cancérogène de classe I car il induit une inflammation gastrique chronique et peut jouer un rôle important. dans le développement de tumeurs malignes gastriques En plus d’avoir été trouvés dans le tractus gastro-intestinal, des espèces d’Helicobacter ont été identifiées dans le tractus intestinal, le foie et les canaux biliaires des animaux, et ont également été trouvées jouer un rôle pathologique dans les maladies entérohépatiques. les animaux et les humains Helicobacter hepaticus, un exemple de telles espèces, a été découvert dans et a d’abord été isolé à partir d’une colonie de souris A / JCr; Récemment, plusieurs groupes de recherche distincts ont détecté des organismes Helicobacter tels que H pylori, H pullorum, H bilis et Helicobacter species flexispira dans la bile, la vésicule biliaire ou le tissu hépatique des patients. Ces rapports suggèrent que les organismes Helicobacter, y compris H pylori, pourraient jouer un rôle dans le développement de maladies hépatobiliaires chez l’homme, similaires au rôle qu’ils jouent dans le développement. de carcinome hépatocellulaire Le carcinome hépatocellulaire est l’un des cancers majeurs dans le monde, avec un million de nouveaux cas estimés chaque année micrographie. En ce qui concerne l’incidence, le CHC se classe cinquième parmi tous les cancers, et les taux d’incidence varient considérablement selon les régions. pays Les régions où le risque de CHC est élevé sont l’Afrique subsaharienne, la Chine et l’Asie du Sud-Est De tous les cas de CHC Chaque année,% d’entre eux se trouvent en Chine continentale et le CHC est la deuxième cause de décès due au cancer en Chine. L’exposition alimentaire à l’aflatoxine B est un des principaux facteurs de risque de CHC, infection chronique par le virus de l’hépatite B Le VHB est de loin le facteur de risque le plus important du CHC en Chine L’infection chronique par le virus de l’hépatite C Le VHC jouerait un rôle relativement mineur dans le développement du CHC en Chine Cependant, aucun facteur de risque reconnu Nous avons donc initié une étude pour déterminer si des espèces d’Helicobacter pouvaient être identifiées dans le tissu hépatique de patients chinois atteints de carcinome hépatique primaire. Des prélèvements de tissus de donneurs provenant de patients qui ont eu un cancer du foie. ont subi une chirurgie hépatique ou une cholécystectomie ont été étudiés Parmi ces patients, les hommes et les femmes ont eu un CHC Les autres patients les femmes, qui n’avaient pas de tumeur maligne, étaient considérées comme des sujets témoins; de ces patients avaient une lithiase biliaire, un hémangiome hépatique, une hyperplasie nodulaire focale hépatique et un adénome hépatique. Le diagnostic de la maladie hépatobiliaire a été fait sur la base des résultats des tests histopathologiques effectués dans notre hôpital. Les caractéristiques des patients atteints de CHC sont résumées dans le tableau. du foie malin et du foie non malin ont été immédiatement broyés et ensemencés sur des plaques de gélose Columbia pour la culture et conservés à – ° C pour analyse PCR Les échantillons du foie malin et du foie non malin ont été ensuite fixés dans du formol et incorporés dans par la paraffine pour la coloration Le tissu a été homogénéisé et l’ADN a été extrait en utilisant le protocole standard. Pour la PCR, des amorces spécifiques du genre Helicobacter ont été utilisées pour amplifier un fragment -bp du gène S rRNA des espèces Helicobacter. généré par amplification de la souche H pylori ATCC American Type Culture Collection avec amorces C / C o confirmer les amplicons , qui étaient d’origine ARNr S bactérienne plutôt que d’origine génomique humaine non spécifique Les amplicons ont été séquencés directement en utilisant le programme BLAST Basic Local Alignment Search Tool dans GenBank

Caractéristiques des patients atteints d’un carcinome hépatocellulaire primitifCaractéristiques des patients atteints d’un carcinome hépatocellulaire primaireAucune bactérie n’a été cultivée dans des conditions microaérobies et aucune bactérie spirale ou incurvée n’a été observée avec des colorants d’argent pour tous les échantillons. Les HCC se sont avérés positifs pour les espèces d’Helicobacter par analyse PCR avec utilisation des amorces spécifiques au genre Helicobacter C / C, tandis qu’aucun des échantillons de foie des patients sans HCC ne présentait de résultats PCR positifs en utilisant le même tableau d’amorces et la même figure On a également trouvé que chacun des amplicons était positif par hybridation de Southern blot avec une sonde marquée à la digoxygénine. Des fragments d’ADNr de 4 S provenant d’échantillons de PCR positifs étaient directement séquencés. Par comparaison de séquences, tous étaient identiques à l’ARNr S de H pylori GenBank numéro d’accès AF et espèce Helicobacter “foie” Numéro d’accession GenBank AF

Table View largeDownload slideRésultats de PCR pour la détection des espèces d’Helicobacter et les résultats de la comparaison de séquences d’ADNTable View largeDownload slideRésultats de PCR pour la détection des espèces d’Helicobacter et les résultats de la comparaison de séquences d’ADN

Vue de la figure LargeDownload slidePCR produits des fragments -bp obtenus par amplification spécifique du gène Helicobacter Lane M, marqueur de l’ADN; voies -, des échantillons positifs provenant de patients atteints de carcinome hépatocellulaire; voies et, échantillons négatifs de patients sans carcinome hépatocellulaire; voie, souche de contrôle positif Helicobacter pylori ATCC [American Type Culture Collection]; voie, tampon TE de contrôle négatif; et piste, contrôle bactérien Campylobacter jejuniFigure View largeTélécharger slideProduits PCR des fragments -bp obtenus par amplification spécifique au gène Helicobacter Lane M, marqueur d’ADN; voies -, des échantillons positifs provenant de patients atteints de carcinome hépatocellulaire; voies et, échantillons négatifs de patients sans carcinome hépatocellulaire; voie, souche de contrôle positif Helicobacter pylori ATCC [American Type Culture Collection]; voie, tampon TE de contrôle négatif; et la voie, le contrôle bactérien conclusion Campylobacter jejuniOur, ainsi que les conclusions des rapports précédemment publiés , outre démontré que la colonisation Helicobacter du tissu hépatique est présente chez les patients atteints de CHC Pour explorer les causes des maladies chroniques du foie, y compris HCC, sans connue facteurs de risque, de nombreuses études ont été menées sur la recherche de nouveaux virus hépatiques Bien que davantage d’études soient nécessaires pour clarifier la relation causale entre l’infection par Helicobacter et le développement du CHC, les résultats de la présente étude démontrent que les espèces Helicobacter nouveaux agents infectieux associés aux rapports HCC de l’isolement des espèces Helicobacter de la bile et la vésicule biliaire et un rapport de Helicobacter bactériémie suggèrent fortement que les différentes espèces de Helicobacter peuvent se propager au foie par l’arbre du canal biliaire ou un routeInfection hématogène avec plusieurs virus ont été reconnus comme un facteur de risque pour m Cependant, les rapports d’une association d’infection bactérienne avec des cancers sont rares La Chine a une population énorme; L’infection par le VHB est présente chez>% des personnes non sélectionnées en Chine et constitue le principal facteur de risque de CHC . En outre, la prévalence de l’infection par H pylori est de ~% chez les individus en Chine Exploration du rôle pathologique de Helicobacter dans le tissu hépatique des patients atteints de CHC est très important et précieux